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    技術支持

    凱氏定氮儀使用前如何清洗

    技術支持

    凱氏定氮儀是利用凱氏定氮法對物質中蛋白質含量進行測定的專用儀器。凱氏定氮儀按其配置分,可以分為全自動凱氏定氮儀和半自動定氮儀。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。凱氏定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,不同的實驗者,可以根據對實驗操作的熟練程度,自由選擇哪種方式。一般的,新手我們推薦使用自動模式,可以為你省去很多的步驟。目前,凱氏定氮儀已經廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質的測定。

    下面我們主要介紹下,我們在使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質含量時,如何清洗定氮儀。

    儀器安裝前,凱氏定氮儀各部件需經一般方法洗滌干凈,所用橡皮管、塞須浸在10%NaOH溶液中,煮約10min,水洗、水煮10min,再水洗數次,然后安裝并固定在一只鐵架臺上。

    儀器使用前,微量全部管道都須經水蒸氣洗滌,以除去管道內可能殘留的氨,正在使用的儀器,每次測樣前,蒸氣洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器,重復蒸氣洗滌,不得少于三次,并檢查儀器是否正常。仔細檢查各個連接處,保證不漏氣。這樣,一方面保證了儀器的清潔,另一方面,也同時對儀器進行了檢查,一些壞的零部件,可以及時被查出并替換。

    儀器安裝完后,我們需具體對儀器的內部進行清潔。首先在凱氏定氮儀蒸氣發生器中加約2/3體積蒸餾水,加入數滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影響結果,并放入少許沸石(或毛細管等),以防爆沸。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟,用相應的試劑對其進行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經插管流入反應室,但玻杯內的水不要放光,塞上棒狀玻塞,保持水封,防止漏氣。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發生后,立即關閉廢液排放管上的開關,使蒸氣只能進入反應室,導致反應室內的水迅速沸騰,蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發燙開始計時,連續蒸煮5min,然后移開煤氣燈。沖洗完畢,夾緊蒸氣發生器與收集器之間的連接橡膠管,由于氣體冷卻壓力降低,反應室內廢液自動抽到反應室外殼中,打開廢液排出口夾子放出廢液。整個清洗過程,到這里就結束了,經過清洗這個過程,儀器內部環境已經符合我們測定蛋白質含量的需求,另外,儀器的各部件也得到了檢驗,可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分。根據以上步驟重復清洗23次,再在冷凝管下換放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒在溶液中,蒸餾12min,觀察錐形瓶內的溶液是否變色。如不變色,表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去錐形瓶,再蒸餾12min,用蒸餾水沖洗冷凝器下口,關閉煤氣燈,儀器即可供測樣品使用。

    這樣,凱氏定氮儀整個清洗過程就結束了。凱氏定氮儀在測定蛋白質含量前,一般都需要經過清洗,這樣對于測定結果,會更加精確。另外,也可以保證實驗室人員的安全,因為在清洗過程中,對儀器進行了檢查,排除了因為儀器的故障而造成了危險。

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